PCR készülék (thermal cycler) kalibráció
Esettanulmány 103 PX
PyroCAD/Proj.ID: TCC-20050118
Célkitűzés:
Az esettanulmány célja a PyroDisk-XT hőmérséklet kalibráló
rendszer képességeinek bemutatása, továbbá a PCR készülékek hőmérséklet kalibrálás ill. kalibráció
validálás jelentőségének hangsúlyozása. A tanulmány az alábbi feladatokkal foglalkozik:
- a hőmérséklet kalibráció/verifikáció protokoll felépítésének bemutatása
- a hőmérséklet kalibráció/verifikáció eredményének grafikus megjelenítése
- a hőmérséklet kalibráció/verifikáció eredményének kiértékelése a specifikációban foglaltak
függvényében
- hőmérséklet pontosság
- a blokk hőmérsékleti homogenitása
- hőmérsékleti túlfutás (overshoot) & alálövés (undershoot)
- A hőmérsékleti és időeredmények kiértékelésének bemutatása a PCR mérési protokol használatával
- hőmérséklet reprodukálhatóság (a cellák között)
- hőmérséklet ismételhetőség (egy cellán belül)
- idő pontosság
A PCR készülék kalibrálása/verifikációja az alábbi
előnyöket nyújtja a felhasználóknak:
- 21 CFR Part 11 megfelelés - a kalibráció egy 21 CFR Part 11 megfelelő rendszerrel történik
- A kitermelés és a termék tisztasága visszavezethető a készülék hőmérsékleti pontosságára és homogenitására
- A PCR készülék "Performance Qualification"-je monitorozható
- Az karbantartás ütemezhető
- Hatósági megfelelés
- A kalibráció szükségességének analízise segítségével a kalibráció ütemezhető
- OOS, OOT, & CAPA kivizsgálás támogatása
- A befektetés rendkívül jó megtérülése
Definíciók:
A PCR készülék kalibráció egy hőmérsékletmérési eljárás, amely során a PCR protokoll alapján
meghatározott hőmérsékleteken mért értékeket referencia értékekkel (magyar vagy nemzetközi
standardokkal) hasonlítjuk össze. Az összehasonlítás eredményéből kiszámítjuk a korrekciós faktorokat,
amelyek alkalmazása biztosítja, hogy a kalibrált PCR készülék a specifikációban meghatározott
pontosságnak megfelelően működjön.
A PCR készülék kalibráció verifikácója egy hőmérsékletmérési eljárás, amely során egy előre
definiált PCR protokoll alapján meghatározott hőmérsékleteken mért értékeket referencia értékekkel
(magyar vagy nemzetközi standardokkal) hasonlítjuk össze. A verifikáció célja annak bizonyítása,
hogy a kalibrált PCR készülék által mért értékek megfelelnek a specifikációjában leírtakkal.
Megjegyzés:
A kalibráció és a kalibráció verifikáció között az a különbség, hogy amíg a kalibráció során azon
faktorok meghatározása történik, amelyek alkalmazásával a hőmérsékletmérés meg fog felelni a
specifikációban leírt követelményeknek, addig a kalibráció verifikációja során egyszerűen a
kalibrációs faktorok "jóságát" bizonyítjuk.
|
PyroLogger-XT egy 24 csatornás nagyteljesítményű vezetéknélküli hőmérsékleti adatgyűjtő.
A PyroLogger-XT az alábbi műszaki paraméterekkel rendelkezik:
- Hőmérsékleti felbontás ± 0.002 °C
- Hőmérsékleti tartomány -50 °C to 150 °C
- Hőmérsékleti pontosság jobb, mint ± 0.05 °C
- Reprodukálhatóság (a szenzorok között) jobb, mint ± 0.02 °C
- Precizitás (szenzoronként) jobb, mint ± 0.02 °C
- Kalibrált (nemzetközi standarddal szemben).
PyroDisk-Pro egy 21 CFR Part 11 megfelelő felhasználói szoftver, amely elvégzi a
hőmérsékletmonitorozási, hőmérséklet kalibrációs és validációs folyamatokat. A PyroLogger-XT és a
PyroDisk-Pro egy beépített RS232 interfészen keresztül kapcsolódik és biztosítja a feladatok
zökkenőmentes elvégzésének lehetőségét.
Megjegyzés:
a PyroLogger-XT és a PyroDisk-Pro az "ad hoc" hőmérsékleti mérések elvégzésén túl mikrolemez
leolvasók, inkubátorok és PCR/Thermal Cycler-ök hőmérsékleti tulajdonságainak kiértékelésére
készült.
|
21 CFR Part 11 az U.S. szövetségi jogszabály gyűjteményében az elektronikus adatrögzítésről
és az elektronikus aláírásról szóló törvény. A szabályozás minden olyan tevékenységre vonatkozik,
ami az FDA hatáskörébe tartozik, és ahol az adattárolás a papír-alapú rendszer helyett, elektronikus
formában történik. A törvény elsősorban az adatok biztonságára, integritására és nyomonkövethetőségére
fókuszál.
OOS (Out Of Specification) - Minden olyan esemény vagy eredmény, amely az előre meghatározott
specifikációnak vagy követelményeknek nem felel meg és gyanús.
OOT (Out Of Trend) - Minden olyan esemény vagy eredmény, amely az előre meghatározott trend
(pl. kontroll diagram) specifikációnak vagy követelményeknek nem felel meg és gyanús.
Felhasznált anyagok és eszközök:
- Thermo Hybaid Px2 PCR/Thermal-Cycler, S/N: 200962-1053083
- PyroLogger-XT egy 24 csatornás nagyteljesítményű vezetéknélküli hőmérsékleti
adatgyűjtő ("PL-XT" S/N: 0233098632)
- Külső adapter, S/N: 0263599722
- PyroDisk-Pro szoftver
- 8 x Thermowell Tubes, 0.2 ml, Costar, Cat.No.6531, Lot No. 08402007
- 8 x dugó Thermowell Tube-okhoz
- Desztillált víz
- Számítógép - HP Laptop
A kísérlet elvégzésének lépései:
1. Rakjuk be a külső szenzorokat az PCR készülék meghatározott celláiba
2. Csukjuk le a PCR készülék tetejét
3. Programozzuk be a PCR készüléket
4. Programozzuk be a PyroLogger-XT-t (ugyanazt a protokollt használjuk, mint a PCR készülék programozásakor használtunk).
5. Indítsuk el a PCR programot és ezzel egyidőben kapcsoljuk be a PyroLogger-XT-t
6. Amint a PCR program véget ér kapcsoljuk ki a PyroLogger-XT-t
7. Nyissuk fel a PCR készülék tetejét és vegyük ki a külső szenzorokat
8. Olvassuk ki az adatokat a PyroLogger-XT-ből a PyroDisk-Pro program segítségével
9. Értékeljük ki az adatokat
Eredmények:
A harmadik ciklus eredményeinek kiértékelése a PyroDisk-Pro program segítségével
Kiértékelés:
- A hőmérséklet pontosság, a hőmérséklet homogenitás és a hőmérséklet túlfutás jelentősen eltér a
specifikációban meghatározott értékektől.
- A pirossal is kiemelt OOS eredmények nagymértékben befolyásolhatják a reakció kitermelését és
specifikusságát.
|